Clin Cancer Res | 外周血质谱技术评估多发性骨髓瘤MRD监测的突破性临床发布

多发性骨髓瘤（Multiple Myeloma，MM）是血液系统的第二位常见恶性肿瘤，其肿瘤细胞起源于骨髓中的浆细胞，由骨髓浆细胞异常增生造成，多发于中老年人。此外，骨髓瘤的治愈率极低，绝大多数MM患者最终都会复发。多发性骨髓瘤患者会分泌一种具有个体特异性的高浓度免疫球蛋白-M蛋白，血液中M蛋白的浓度可以反映骨髓瘤患者的发病和治疗情况。M蛋白序列具有个体异性，因而只有通过蛋白测序获得其序列，才能实现真正的个性化监测。

2024年1月，快序生物与中国医学科学院血液学研究所安刚团队在Clinical Cancer Research（IF=11.5）上合作发文“Monitoring minimal residual disease in patients with multiple myeloma by targeted tracking serum M-protein using mass spectrometry (EasyM)”。该研究在国内首次证实EasyM蛋白质谱技术可以识别MM患者血清M蛋白的特异序列，并将其作为MM特异性肿瘤分子标记物进行靶向定量追踪，且具有与骨髓NGF检测相比更优的检测灵敏度，为临床微创监测MM患者微小残留病变（MRD）提供了一项新的选择。

文中使用的EasyM技术是快序生物（Rapid Novor）历时5年研发的成果，已经拿到美国《临床实验室改进修正案》（Clinical Laboratory Improvement Amendments）认证，可以作为独立的第三方检验机构给患者和药企提供服务。

摘要

该研究以国家血液病纵向队列-多发性骨髓瘤子队列中56例新诊断MM患者为研究对象，使用EasyM蛋白质谱技术分析了56例MM患者的447份血清样本中的M蛋白。将EasyM技术与现有的MRD监测技术相比，其中包括血清免疫固定电泳（IFE）、骨髓多参数流式细胞术（MFC）和二代流式细胞术（NFG），发现在其他检测方式结果为阴性的时候，EasyM仍能在一些患者外周血清中检测到残存的M蛋白。表明EasyM是一种高度敏感的、微创的多发性骨髓瘤MRD监测方法，可提前预测疾病的复发与进展。

结果

1. EasyM血检流程

EasyM多发性骨髓瘤血检分为M蛋白测序和个性化监测两个阶段：

第一阶段：仅需采取患者外周血，使用蛋白质谱对每一个患者血清中的M蛋白进行测序。

第二阶段：得到患者个体特异性的M蛋白序列后，从中筛选出克隆型肽段（M蛋白的CDR序列中含有至少一个突变的肽段，可作为MM特异性肿瘤分子标记物），通过靶向蛋白定量的方法，可对病程各个阶段的患者的血清M蛋白进行精准定量，追踪其浓度变化，实现对病情的监测（图1）。

2. EasyM追踪检测MM患者体内M蛋白水平

在长达两年的时间跨度下，使用EasyM方法追踪MM患者体内M蛋白水平。与常规的血清检测方法-血清蛋白电泳（SPEP）和血清免疫固定电泳（IFE），EasyM提供的M蛋白检测灵敏度更高，可以更早、更准确地检测MM复发（图2B）。在本次研究中，经过长期的监测发现，如果M蛋白连续两次检测翻倍，或者单次检测增加3倍，可作为复发的指标。如图2B所示，临床反应评估显示，患者29 （P29）在T7时仍处于完全缓解（CR）状态，但是从T6到T7时间段, M蛋白明显增加了3倍，提示有复发的风险。而实际情况与EasyM预测的一致，P29患者在T7后4个月出现了疾病进展（PD）。表明EasyM技术可以提前预测多发性骨髓瘤的复发。

3. MS-MRD与IFE、MFC-MRD和NGF-MRD方法比较

使用相同时间点采集的样本进行比较，MS-MRD与IFE相比，70.8%的样本为MS-MRD和IFE双阳性，3.3%的样本为MS-MRD和IFE双阴性，25.7%的样本为MS-MRD阳性和IFE阴性，说明MS-MRD的敏感性强于IFE。骨髓二代流式细胞术（NGF）作为MRD检测的金标准，在骨髓NGF检测为阴性的样本中，有81.8%的样本为MS-MRD阳性。计算结果显示，MS-MRD与骨髓多参数流式细胞术（MFC）和骨髓NGF相比，敏感性均为100.0%，特异性分别为1.9%和22.2%（图3B,C）。表明MS-MRD与这些检测方式相比，也具有更高的敏感性和检测MRD阳性患者的能力。根据ROC曲线获得定量cutoff值，设置M蛋白百分比小于1.86%作为cutoff值后，MS-MRD的灵敏度和特异性都有相应的提高。

4. MS-MRD对预后的影响

将56例患者分为MS-MRD阳性组（n=19）和MS-MRD阴性组（n=37），计算每组的中位无进展生存期（mPFS）和中位总生存期（mOS）。MS-MRD阳性组和阴性组的mPFS分别为20.6个月和61.8个月（图4A）。MS-MRD阳性组的mOS为55.7个月，MS-MRD阴性组的mOS未达到（图4B）。上述结果显示，MS-MRD阴性组的mPFS和mOS均明显长于MS-MRD阳性组。

图4. MS-MRD阳性组和阴性组患者的PFS和OS

讨论

该研究是国内首次证实蛋白质谱（MS）技术可以识别MM患者血清M蛋白的特异序列，并将其作为MM特异性肿瘤分子标记物进行靶向定量追踪，且具有与骨髓NGF检测相比更优的检测灵敏度，为临床微创监测MM患者微小残留病变（MRD）提供了一项新的选择，能提前发现骨髓瘤的复发。

关注点

文中使用的快序生物（Rapid Novor）旗下原研首创产品EasyM™，已经正式通过了美国医疗保险和医疗补助服务中心的严格审核，获得临床实验室改进修正案（ Clinical Laboratory Improvement Amendments，简称CLIA）认证，可以作为独立的第三方检验机构给患者和药企提供服务。

EasyM™是用于多发性骨髓瘤的一项创新血检技术，主要通过外周血进行多发性骨髓瘤MRD（微小残留病变）的动态序列监测。相较于现有临床使用的有创骨髓穿刺的血检方法，EasyM™采取的无创血检既减少了对患者造成痛苦的风险，其灵敏度也显著提高。